簡要描述:HaCaT 人永生化表皮細胞,原代細胞|細胞系|細胞株|菌種;細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和培養(yǎng)條件
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HaCaT 人永生化表皮細胞
細胞株名稱:HaCaT 人永生化表皮細胞
種屬:人
性別:
組織來源:皮膚
生長特性:貼壁生長
形態(tài)特征:上皮細胞樣
*培養(yǎng)基:
DMEM(內含2mM L-glutamine)+15%胎牛血清
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
HaCaT
凍存液:95%*培養(yǎng)液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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